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    Polysciences全國代理-上海鼎桑

    Polysciences全國代理-上海鼎桑

    更新時(shí)間:2024-06-12

    產(chǎn)品特點(diǎn):
    Polysciences全國代理-上海鼎桑 美國POLYSCIENCES公司成立于1961年,主要生產(chǎn)和經(jīng)營(yíng)LIFE SCIENCES生命科學(xué)(膠體金,不含甲醛的甲醇等),病理學(xué)和顯鏡學(xué) 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產(chǎn)品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供應商,同時(shí)是世界*的免疫學(xué),組織化學(xué)試劑耗材供應商.
    產(chǎn)品介紹
    產(chǎn)地進(jìn)口加工定制

    我們公司zui大優(yōu)勢是強大的采購

      上海鼎桑生物科技有限公司一家專(zhuān)注于生命科學(xué)的科技企業(yè),由在國內科研試劑領(lǐng)域有著(zhù)豐富從業(yè)經(jīng)驗的技術(shù)團隊和管理團隊組建而成,專(zhuān)營(yíng)進(jìn)口生物試劑,科學(xué)儀器,實(shí)驗消耗品等。
           公司將不斷把上優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品引入國內市場(chǎng),滿(mǎn)足客戶(hù)的需求,公司也將緊跟生命科學(xué)的發(fā)展,為廣大科研工作者探索生命科學(xué)的奧秘奉獻綿薄之力.

    Polysciences全國代理-上海鼎桑

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    PEI轉染手冊

    轉染操作流程:
     
      1、細胞傳代:

    轉染前24h內分離293T細胞至含10%胎牛血清的DMEM培養基 中進(jìn)行傳代培養,接種密度如下:
             6孔板:0.5x106細胞
             10cm培養皿:4.0x106細胞
             15cm培養皿:9.0x106細胞

    2、轉染

    轉染前將所有試劑置于室溫。

    2.1質(zhì)粒DNA的稀釋

    在無(wú)菌試管中,用無(wú)血清的DMEM W / O酚紅培養基(濃度為10%)稀釋質(zhì)粒DNA(ug)。病毒包裝體(psPAX2):病毒包膜(pMD2G)和重組質(zhì)粒DNA的稀釋比例分別為4:2:1。
           

    6孔板:200ul+3ug的DNA
            10cm培養皿:1ml+7-8ug的DNA
            15cm培養皿:2ml+11-12ug的DNA

       2.2 轉染復合體形成

    將PEI(1ug/uL)加入已稀釋的總DNA中,PEI與DNA(ug)的混合比率為3:1。加入后立即渦旋混合。
          

     6孔板:9ul PEI復合體(1ug/ul)=9ug
            10cm培養皿:21ul PEI復合體(1ug/ul)=21ug
            15cm培養皿:33ul PEI復合體(1ug/ul)=33ug
    將添加到細胞的DNA/ PEI的混合物在室溫下孵育15分鐘。


    4、收獲轉染細胞

    轉染后48小時(shí)內收獲轉染細胞/或病毒上清。
     
    試劑的配制:
    PEI(1ug/ul) Polysciences(CAT#23966-2配制成儲液:)
    1、將無(wú)內毒素的無(wú)菌水加熱至80℃左右溶解PEI,冷卻到室溫。
    2、調整pH值至7.0,用0.22um的濾器過(guò)濾消毒,分裝后儲存在-20℃。工作液可保持在4℃

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